Antworten auf professionelle Fragen zum Ultrafiltrations-Zentrifugalrohr

1. Was ist das Membranmaterial des Ultrafiltrationsrohrs?

Polyethersulfonmembran hat eine klare und genaue Molekulargewichtsabhörung, stabile physikalische und chemische Eigenschaften, eine extrem niedrige Proteinadsorption und eine hohe Produktrückgewinnung

2. Wenn Proteine mit unterschiedlichen Molekulargewichten getrennt werden müssen, wie viel Unterschied benötigt das Molekulargewicht von Proteinen?

Die beiden Proteine müssen 10-mal oder mehr unterschiedlich groß sein

3. Kann ein Ultrafiltrationszentrifugenröhrchen für die Viruskonzentration verwendet werden?

Ultrafiltrationszentrifugenröhrchen können das Virus viele Male oder sogar hohe Male konzentrieren. Wir haben eine spezielle Membran für das Virus. Verschiedene Viren müssen die geeignete Membranporengröße wählen

4. Kann das Ultrafiltrationszentrifugenröhrchen desinfiziert und alkalibeständig sein?

Es kann mit 75% iger wässriger Ethanollösung desinfiziert werden. Unser Material kann 0,1-0,5n Natronlauge alkalisches Waschen standhalten

5. Kann Ultrafiltrationszentrifugenröhrchen für die Hochdrucksterilisation verwendet werden

Wir haben ein spezielles Ultrafiltrationszentrifugenröhrchen, das für die Hochdrucksterilisation geeignet ist

6. Kann das Ultrafiltrationsröhrchen unter Berücksichtigung der Proteinstabilität bei niedriger Temperatur zentrifugiert werden?

Ja, unser Material ist beständig gegen niedrige Temperaturen, aber die Konzentrationszeit wird länger sein. Die Filtrationsgeschwindigkeit der Membran hängt mit der Temperatur der Zufuhrflüssigkeit zusammen

7. Über die Rückgewinnungsrate

Im Allgemeinen beträgt die Rückgewinnungsrate von gelösten Stoffen mit einer Konzentration von mehr als 0,1 mg / ml 90% oder mehr. Im Allgemeinen wird der Verlust von Proben durch unspezifische Adsorption auf der Oberfläche der Filtermembran und der Oberfläche des Materialrohrs verursacht. Um eine hohe Rückgewinnungsrate zu erhalten, beträgt das zurückgehaltene Molekulargewicht der ausgewählten Filtermembran etwa 1 / 3 des Zielproteins, die Ultrafiltrationsmembran ist eine asymmetrische Membran, ihre Porengröße ist normalverteilt und sie kann unter zentrifugalem Hochdruck austreten. Unter dieser Bedingung kann die Proteinflüssigkeit verformt werden, daher gilt: Je kleiner die Abfangöffnung ist, desto langsamer ist die Durchflussrate, aber die Rückgewinnungsrate ist höher.

8. Wenn Protein konzentriert ist, gibt es Niederschlag. Wie geht man damit um?

Wenn das Protein zu schnell oder zu stark konzentriert ist, kann es zu Proteinausfällungen kommen. Die Endkonzentration nach der Proteinkonzentration sollte nicht zu hoch sein; Für Proteine, die empfindlich auf die Konzentrationsrate reagieren und leicht auszufallen sind, lauten die vorgeschlagenen Verbesserungsmethoden wie folgt:

1) Reduzieren Sie die Zentrifugalgeschwindigkeit,

2) Verwenden Sie eine Ultrafiltrationsmembran mit größerem Molekulargewicht

3) Blasen und saugen Sie das Konzentrationsrohr und zentrifugieren Sie dann

9. Was sind die möglichen Gründe, warum das Ultrafiltrationszentrifugenröhrchen nicht heruntergeschleudert werden kann?

Wenn das Ultrafiltrationsröhrchen nicht zentrifugiert werden kann, kann die anfängliche Zentrifugation mit etwa 20% iger wässriger Ethanollösung durchgeführt werden, da nach dem vollständigen Trocknen der Ultrafiltrationsmembran die Membranoberfläche schwach hydrophob ist und der Flussfluss nach dem Einweichen mit Lösungsmittel mit niedriger Oberflächenspannung wiederhergestellt werden kann

10. Ordnungsgemäße Verwendung und Konservierung des Ultrafiltrationsrohrs

Das Ultrafiltrationsröhrchen muss vor der Verwendung zunächst mit gereinigtem Wasser zentrifugiert werden, um seine Integrität zu überprüfen. Nach jedem Gebrauch ist es erforderlich, es in einem nassen Zustand zu lagern, um zu verhindern, dass die Membran austrocknet

11. Wie entferne ich Endotoxin aus dem Ultrafiltrationsröhrchen?

Das von uns zur Verfügung gestellte Ultrafiltrationsröhrchen wurde nicht mit Endotoxin behandelt. Gleichzeitig können Proben, die interne Toxine benötigen, aufgrund der weit verbreiteten Existenz von Endotoxinen in der Natur vor dem Experiment mit 0,5 N Natriumhydroxid vorgereinigt und dann mit RO-Wasser gereinigt werden, um den größten Teil des Endotoxins zu entfernen.

12. Wenn das konzentrierte Protein stromabwärts analysiert wird, wird festgestellt, dass es Interferenzen gibt. Was ist der Grund?

Das Ultrafiltrationsrohr kann mit Puffer oder gereinigtem Wasser vorgereinigt werden. Wenn die Störung weiterhin besteht, reinigen Sie sie mit 0,1 N Natriumhydroxid und reinigen Sie sie dann mit gereinigtem Wasser

13. Im Konzentrationsprozess kann es zu einer unspezifischen Adsorption zwischen dem Zielprotein und der Ultrafiltrationsmembran kommen. Wie kann man es verbessern?

Wir verwenden hydrophile Polyethersulfonmembran, aber für einige Proteine mit besonderen Eigenschaften kann ihre unspezifische Adsorption mit der Membran verstärkt werden. In diesem Fall können wir versuchen, das Ultrafiltrationsröhrchen vor dem Experiment vorzubehandeln, oder unseren Ingenieur kontaktieren.

14. Nach der Konzentration stellt sich heraus, dass das Zielprotein kein Zielprotein enthält. Was sind die möglichen Gründe?

1) Die Anfangskonzentration des Proteins sollte nicht zu niedrig sein. Wenn die Konzentration zu niedrig ist, darf die Membran nicht zurückgehalten werden

2) Wählen Sie die geeignete Membranporengröße. Die Zentrifugation und Konzentration von Ultrafiltrationsröhrchen gehört zur Sackgassenfiltration. Die Membranporengröße beträgt im Allgemeinen weniger als das 2-fache oder mehr des Zielproteins

3) Wählen Sie die geeignete Fliehgeschwindigkeit

4) Ob das Zielprotein ausfällt