Faktoren, die den Effekt der Virusentfernung beeinflussen

Faktoren, die den Effekt der Virusentfernung beeinflussen

Durch die Virenentfernungsfiltration können Viren in Lösungen erheblich entfernt werden, und ihre Entfernungswirkung hängt davon ab, wo die Virenentfernungsfiltration stattfindet, von der Proteinkonzentration der Zufuhrflüssigkeit, vom Filtrationsdruck, von der Lagerzeit und von der Kryokonservierung usw.

1. Wo die Virenentfernungsfiltration stattfindet

Die Virusentfernungsfiltration kann überall in der nachgeschalteten Reinigung erfolgen, findet jedoch normalerweise nach der Virusinaktivierung bei niedrigem pH-Wert, Zwischenchromatographieschritten oder abschließenden Chromatographieschritten statt. Insgesamt hängen die tatsächlichen Filtrationsanforderungen im gesamten Downstream-Prozess stark davon ab, an welcher Stelle im Prozess sich der Virusfiltrationsschritt befindet, da Proteinkonzentration, Reinheit und Prozessvolumen variieren können.

2. Proteinkonzentration der Futterflüssigkeit

Die Proteinkonzentration der Probe beeinflusst den Fluss der Virusentfernungsfiltration durch die Wechselwirkung zwischen der Zufuhrlösung und dem Membranbeutel. Eine höhere Proteinkonzentration verringert die Geschwindigkeit des Filtrationsprozesses zur Virusentfernung. Es hängt auch mit den Eigenschaften des Proteins selbst und der Membran selbst zusammen. Normalerweise wird die Produktkonzentration während der kontinuierlichen Verdünnung des Produkts reduziert, um die Kapazität und Durchflussrate der Filtermembran zur Virenentfernung zu erhöhen.

3. Filterdruck

Der Prozess der Virenentfernungsfiltration muss im Allgemeinen eine kontinuierliche Filtration gewährleisten. Denn die Druckunterbrechung kann zum Eindringen von Viren führen. Das Prinzip ist: Der Konvektionseffekt der durch den Filter fließenden Speiseflüssigkeit führt dazu, dass die Viruspartikel auf der Oberfläche der Membran oder aufgrund des Molekülgrößenausschlusses in der kleineren Porengröße festgehalten werden. Wenn der Druck sinkt, nehmen die Strömungsgeschwindigkeit und der Konvektionseffekt ab. Das Virus entweicht aus kleinen Poren und diffundiert mit hoher Wahrscheinlichkeit in große Poren.

4. Lagerzeit und Kryokonservierung

Einige Proteine ​​bilden während des Lagerungsprozesses, insbesondere während der Kryokonservierung, Aggregate. Diese Aggregate können einen Einfluss auf die Virenentfernungsfiltration haben. Daher muss geprüft werden, ob es im Produktionsprozess zu einer langen Lagerung kommt oder wann eine Kryokonservierung erforderlich ist.