Guidling Technology bringt Ihnen das Erlernen der einfachen und effizienten Methode der Entsalzung und Konzentration näher

Proteine ​​müssen nach der Trennung und Reinigung häufig entsalzt werden, und diese Salze stammen hauptsächlich aus verschiedenen Ionen in lebenden Organismen (z. B. Natriumionen, Kaliumionen, Chloridionen usw.) sowie aus Puffersalzen in den Extrakten und Salzen in den Eluenten und Salzbestandteile bestimmter Denaturierungsmittel, die für Experimente verwendet werden. Eine hohe Salzkonzentration kann die Aktivität und Stabilität von Proteinen sowie deren Wechselwirkungen mit anderen Molekülen beeinträchtigen, Störsignale erzeugen oder die Genauigkeit von Messungen bei nachfolgenden Analysemethoden wie Elektrophorese, Massenspektrometrie und kristallographischen Untersuchungen verringern. Daher ist es unbedingt erforderlich, die gereinigten Proteine ​​nach der Trennung zu entsalzen. Die wichtigsten häufig verwendeten Entsalzungsmethoden sind Membranchromatographie (Dialyse und Ultrafiltration) und Gelfiltrationschromatographie. Darüber hinaus kann die Entsalzung in manchen Fällen auch durch Verdünnung erreicht werden.

 

Aufgrund des langen Zyklus und des Bedarfs an einer großen Menge an Ersatzflüssigkeit ist die Anwendung der Dialyseentsalzung stark eingeschränkt und wird in der Industrie weniger, sondern hauptsächlich teilweise im Labor eingesetzt. Das Labor wird auch nach und nach durch Ultrafiltrationsröhrchen ersetzt /Ultrafiltrationsbecher.

 

Die wichtigste Membrantrenntechnologie, die im Prozess der Proteinentsalzung und -konzentration eingesetzt wird, ist die Ultrafiltration. Ultrafiltration ist eine Membrantrenntechnologie mit hoher Effizienz, geringem Energieverbrauch, keinem Phasenwechsel, keinem Zusatz chemischer Reagenzien, einfacher Bedienung, milden Bedingungen, der Fähigkeit, die Aktivität biologischer Makromoleküle besser aufrechtzuerhalten, hoher Rückgewinnungsrate und anderen Vorteilen und seine Verwendung bei der Proteintrennung und -reinigung bietet einzigartige Vorteile.

 

Ultrafiltration ist eine Membranfiltrationsmethode, die eine poröse Membran als Trennmedium verwendet und auf der Druckdifferenz zwischen den beiden Seiten der Membran als treibende Kraft zur Trennung von Substanzen unterschiedlichen Molekulargewichts in Lösung beruht und somit eine Rolle bei der Entsalzung und Konzentration spielt und Reinigung. Dabei handelt es sich um ein in den letzten Jahren neu entwickeltes Verfahren, das sich besonders für die Konzentration bzw. Entsalzung biologischer Makromoleküle, insbesondere Proteine ​​und Enzyme, eignet. Der Schlüssel zur Anwendung der Ultrafiltration liegt in der Wahl der Membran. Verschiedene Membrantypen und -spezifikationen unterscheiden sich in der Wasserdurchflussrate, der Molekulargewichtsgrenze und anderen Parametern und müssen entsprechend den jeweiligen Arbeitsanforderungen ausgewählt werden. Darüber hinaus haben die Form des Ultrafiltrationsgeräts, die Zusammensetzung und Eigenschaft des gelösten Stoffes, die Lösungskonzentration usw. einen gewissen Einfluss auf die Wirkung der Ultrafiltration.

 

Die Anwendung der Ultrafiltrationstechnologie zur Entsalzung und Konzentration von Proteinen im Reinigungsprozess von Proteinen zeichnet sich durch ihre Eignung für die Behandlung großer Flüssigkeitsmengen im Bereich von einigen hundert bis einigen tausend Litern mit den Vorteilen einfacher Bedienung und Zeitersparnis aus und hohe Proteinrückgewinnungsrate. Die Ultrafiltrationsmethode hat sich aus Ultrafiltrationsröhrchen für die Mikrovolumenverarbeitung im Labor, Ultrafiltrationsbechern für die Verarbeitung kleiner Volumina und Ultrafiltrationssystemen für den industriellen Einsatz entwickelt.

 

Die Ultrafiltration wird in Direktdruck-Ultrafiltration und Tangentialflussfiltration unterteilt. Derzeit wird in der Industrie hauptsächlich die Tangentialflussfiltration eingesetzt, die in der Entsalzung und beim Pufferaustausch weit verbreitet ist.

 

Das Folgende ist ein Beispiel für die Anwendung der Ultrafiltrationsmembrankassetten von Guidling Technology bei der Proteinentsalzung und -konzentration.

 

Wir verwendeten eine {{0}}.11㎡ 10 kd große Membrankassette (G01100010K), um 500 ml PEG-modifizierte Wachstumshormonlösung mit einer Konzentration von 0,2 mg/ml zu entsalzen und zu konzentrieren. Während des gesamten Ultrafiltrationsprozesses wurden die Entsalzungsrate, die Proteinrückgewinnungsrate, der Zustand des Membranflussausfalls und die Wasserflussrückgewinnungsrate untersucht.

 

Vor und nach der Verwendung haben wir den Wasserfluss der Membrankassette separat getestet und die Rückgewinnungsrate der Membrankassetten erreichte 98 % unter der Voraussetzung, dass die gleiche Zufuhrrate, der gleiche Zufuhrdruck und der gleiche Rückflussdruck aufrechterhalten wurden.

 

Der gesamte Prozess verarbeitete insgesamt 2 l Material und dauerte 40min, 0-5min war der Konzentrationsprozess, 5-35min war der Flüssigkeitsaustauschprozess und 35-40min war der Überkonzentrationsprozess. Während des gesamten Ultrafiltrationsprozesses wurde das TMP zwischen 0,7-0,8 bar stabilisiert, die Zufuhrrate war konstant und der durchschnittliche Materialfluss betrug 27 LMH.

 

2 l Material, konzentrierter Flüssigkeitsaustausch auf 60 ml, etwa 33-fach konzentriert, Entsalzungsrate erreicht 99 %, Rückgewinnungsrate erreicht 80 %, nach einer Wäsche eine Erhöhung um 50 ml Flüssigkeit, die Gesamtrückgewinnung beträgt 88 %, industrielle Produktion gemäß Das Totvolumen der Pipeline-Berechnungen, so weit wie möglich, die Anzahl der Male des oberen Waschens zu erhöhen, kann im allgemeinen dreimaligen oberen Waschen vollständig wiederhergestellt werden.

 

Die Membrankassetten von Guidling Technology bestehen aus inerten Materialien medizinischer Qualität mit starker Korrosionsbeständigkeit und können starker alkalischer Reinigung standhalten. Der Einsatz eines automatisierten Herstellungsprozesses gewährleistet die Kontinuität und Qualitätszuverlässigkeit des Produkts, eine höhere mechanische Festigkeit, Gegendruckbeständigkeit und wiederholte Spülleistung. es verfügt über eine Superhydrophilie, die der Membran einen höheren Fluss und eine geringere Proteinadsorption verleihen kann; Außerdem verfügen wir über ein optimiertes Strömungskanaldesign mit geringerem Druckabfall, was den Materialtransfer erleichtert und die Filtrationszeit deutlich verkürzt.

 

Unsere Membrankassetten sind in einer Vielzahl von Porengrößen erhältlich, von 1 kd bis 1000 kd. Unter diesen können 1-10kd-Ultrafiltrationsmembrankassetten zur Entsalzung und Pyrogenentfernung verwendet werden; 30-kd-Ultrafiltrationsmembrankassetten können zur Konzentration monoklonaler Antikörper und zum Pufferaustausch verwendet werden. Gleichzeitig können unsere Hohlfaserprodukte auch zur Konzentration und zum Ersatz von Biologika mit Porengrößen von 100 kd, 300 kd und 500 kd verwendet werden, die hauptsächlich für eine Vielzahl von Anwendungen in Impfstoffprodukten verwendet werden.

 

Guidling Technology ist ein nationales High-Tech-Unternehmen mit den Schwerpunkten Biopharmazeutika, Zellkultur, Reinigung und Konzentration von Biomedizin, Diagnose und Industrieflüssigkeiten. Wir haben erfolgreich Zentrifugalfiltergeräte, Ultrafiltrations- und Mikrofiltrationskassetten, Virenfilter, TFF-Systeme, Tiefenfilter, Hohlfasern usw. entwickelt, die die Anwendungsszenarien von Biopharmazeutika, Zellkultur usw. vollständig erfüllen. Unsere Membranen und Membranfilter werden häufig zur Konzentration, Extraktion und Trennung von Vorfiltration, Mikrofiltration, Ultrafiltration und Nanofiltration eingesetzt. Unsere zahlreichen Produktlinien, von der kleinen Einweg-Laborfiltration bis hin zu Produktionsfiltrationssystemen, Sterilitätstests, Fermentation, Zellkultur und mehr, erfüllen die Anforderungen von Tests und Produktion. Guidling Technology freut sich auf die Zusammenarbeit mit Ihnen!